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蛋白marker新上映_2000bp的marker条带图(2024年12月抢先看)

内容来源：飘花网电影所属栏目：导读更新日期：2024-12-01

蛋白marker

赛维尔生物梯度制胶仪：WB老师的得力助手各位做WB实验的老师们，你们是不是经常为配制蛋白胶而头疼？尤其是那些需要梯度分离的实验，手动配制不仅麻烦，还容易出错。别担心，赛维尔生物的梯度制胶仪来帮你解决这个问题！梯度胶分辨率更高，分离效果更好 𐟌ˆ 这款制胶仪可以配制4%-20%的各种浓度梯度胶，分辨率更高，对蛋白的分离效果也更好。比如，你可以看到10%等度胶和4-20%梯度胶的考染图，蛋白Marker（G2087）上样5，普通电泳缓冲液（G2018），90V电泳20分钟（上层胶），150V电泳35分钟（下层胶）。这样的条件下，梯度胶的分离效果和分辨率都非常出色。操作简单，避免提前凝固 𐟧Š 有时候手动配制蛋白胶，操作起来真的很麻烦，尤其是大量配制时，试剂很容易提前凝固。赛维尔生物的制胶仪可以设置简单的操作流程，试剂实时混匀，避免提前凝固，连续制胶也不在话下。试剂盒价格亲民 𐟒𐊊配套的试剂盒价格也很亲民，248元/套，可以连续制胶约260块，每块胶的成本不到1元钱。而且只识别市面上常见的玻璃板，使用起来非常方便。设备价格和购买优惠 𐟒𘊊这款制胶仪的价格是26000元，预存10万元还送仪器，性价比超高。对于那些经常需要配制蛋白胶的实验室来说，这绝对是一个福音。总结 𐟓 赛维尔生物的梯度制胶仪不仅操作简单，试剂盒价格亲民，而且可以连续制胶，避免了很多麻烦。对于那些需要梯度分离的实验来说，这款仪器简直是得力助手。赶紧试试吧！

选PVDF膜秘籍𐟔 聚偏二氟乙烯膜（PVDF膜）是蛋白质印迹中常用的一种固相支持物。由于这种膜对蛋白质具有高亲和力，且具有较高的机械强度，因此非常适合于蛋白质转移和蛋白质印迹等应用，是蛋白分离与免疫检测的理想载体。那么，如何选择合适的PVDF膜呢？主要看两个方面：孔径大小和蛋白结合能力。 𐟔 孔径大小用于蛋白质免疫印迹实验（Western Blot，WB）的PVDF膜常用规格有两种：0.22um孔径和0.45um孔径。随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量的蛋白结合就越牢固。大于20kDa的蛋白一般选用0.45um的膜，小于20kDa的蛋白则一般用0.22um的膜。由于0.22um的PVDF膜内部表面积大约是0.45的PVDF膜的三倍，因此其吸附能力更高。总之，研究者需要根据所研究蛋白的特性和大小来选择合适的PVDF膜孔径，以获得最佳的结合效果。 𐟒꠨›‹白结合能力 PVDF膜的蛋白结合能力越强，意味着蛋白质通过与膜接触发生的疏水作用而更加牢固地吸附在PVDF膜上。目前，像国外的Millipore、GE等公司都有蛋白结合性能不错的PVDF膜，但进口膜普遍价格偏高，很多实验室经费受限。好在现在很多国产PVDF膜也做得不错，例如BIOG的PVDF膜。近期，我们实验室购入了两款PVDF膜。相同电转实验条件下，对比两个品牌的PVDF膜电转结果显示，蛋白marker的各条带均可被转到两款膜上，BIOG PVDF膜上的条带似乎更为清晰一些；观察膜后滤纸情况发现，左图部分蛋白分子已经透过某厂家的PVDF膜转移到滤纸上，而BIOG的PVDF膜则能更好地结合蛋白分子，使其保留在膜上。以上结果说明，BIOG这款PVDF膜的蛋白结合能力更强。当然，它的机械强度与坚韧度也是比较高的、耐热稳定性也不错。如果经常做WB实验的研究者，可以尝试一下。 ⚠️ 注意事项 PVDF膜具有高度疏水性，因此在浸入转印缓冲液之前必须先用甲醇浸湿来进行预处理。用甲醇处理的目的是活化膜上的正电基团，使其更容易与带负电的蛋白结合。希望这些信息能帮助你选择到合适的PVDF蛋白免疫印迹膜，让你的实验更加顺利！

SDS-PAGE电泳及转膜全攻略一、制胶确定蛋白分子量，选择合适的SDS-PAGE胶浓度，并准备好灌胶模具。分离胶的配置：按照配方加入试剂并混匀，过硫酸铵现配现用。缓慢倒入模具，覆盖乙醇液封，等待10-20分钟。分离胶和乙醇层出现清晰界面时，倒掉乙醇。浓缩胶的配置：按照配方加入试剂并混匀（避免气泡）。将浓缩胶匀速倒入分离胶上方，避免气泡，插入梳子。等待30分钟，凝胶聚合后放入4℃保存，可加入少量电泳液或水保持湿润。二、上样与电泳内槽加入1x电泳缓冲液，确保液体浸没凝胶上端和胶板底部导电孔。外槽加满电泳液。样品与上样缓冲液按4:1比例混合，95℃-100℃加热5分钟。在同一片胶的孔中加入蛋白marker作为参照。电泳开始时使用80V低电压，待溴酚蓝跑过浓缩胶后，加大电压至120V。待marker显示的目标蛋白与其他蛋白明显分离时停止电泳。三、转膜根据胶的大小剪PVDF膜和滤纸，放入转膜缓冲液中平衡5分钟。组装转膜夹：红色朝下—海绵垫—滤纸—膜—胶—滤纸—海绵垫，夹紧后放入转移槽。加转膜缓冲液，将转移槽置于冰中。根据蛋白分子量确定转膜的电压、电流、时间。转膜结束后，切断电源，取出PVDF膜。四、封闭与免疫杂交将膜置于封闭缓冲液中，室温封闭2小时。加入稀释过的一抗，室温孵育1-2小时或4℃过夜。用TBST洗膜。加入稀释过的二抗，室温孵育1小时。 TBST洗膜。

思科捷marker，科研神器！最近发现了一个超好用的科研神器——思科捷蛋白marker！这可是朋友强烈推荐的，我已经复购好几次了，真的是爱不释手。每次电泳结束，条带尺寸分布得特别合理，条带清晰锐利，最低只需上样量很少就能看出效果。相比之下，一些国产品牌的marker也还不错，但思科捷的这款真的让我眼前一亮。如果你也在做科研，强烈推荐试试这款三色预染蛋白质Marker，13-250kDa的分子量范围，简直不要太方便！记得存放在-20Ⰳ，有效期到2025年11月，不用担心过期问题。总之，这款marker真的是我科研路上的好帮手，强烈推荐给各位科研小伙伴们！

爱博泰克分子生物学产品使用心得在进行Western blot实验时，我尝试了爱博泰克（abclonal）的蛋白marker、抗体（一抗、二抗）和抗体稀释液等产品。与之前使用过的其他品牌相比，爱博泰克的产品在实验结果上表现更佳。 𐟓Š 蛋白marker：使用3ul的爱博泰克蛋白marker，条带清晰且无杂带，蛋白胶上的条带非常直且干净。 𐟒‰ 抗体：一抗和二抗的特异性较高，能够有效地识别目标蛋白，实验结果更为准确。 𐟧𔠦Š—体稀释液：使用爱博泰克的抗体稀释液，能够更好地调节抗体浓度，确保实验结果的稳定性。总的来说，爱博泰克的分子生物学产品在使用体验上给我留下了深刻印象，特别是在Western blot实验中，其产品表现出了卓越的性能。我强烈推荐使用爱博泰克的相关产品。

李记三色Marker，电泳转膜神器！今天要给大家介绍的是李记生物的超级产品——三色预染蛋白marker（10-180kd）！这可是电泳和转膜的好帮手哦！产品亮点 𐟌Ÿ 这个三色预染蛋白marker包含了从10KD到180KD的10种高度纯化的重组蛋白质，每种都带有His标签。特别的是，70KD的条带是橙红色的，10KD的是绿色的，其他的都是蓝色的。这样的颜色分布让你在SDS-PAGE和Western blot中都能轻松识别。使用方法 𐟧ꊨ🙤𘪥𝩨‰𒩢„染蛋白marker已经配好了1㗓DS-PAGE上样缓冲液，直接用就行，不用煮沸、稀释，也不用加还原剂处理。上样时，根据上样孔的大小，每次5~10就足够了。电泳时、电泳后和转膜后，你都能看到非常清晰的蛋白条带。运输与保存 𐟚š❄️ 运输时要用蓝冰，确保温度控制在4℃，这样可以短期保存2个月。如果需要长期保存，可以放到-20℃，有效期长达36个月。总结 𐟓 李记生物的三色预染蛋白marker真的是电泳和转膜的好帮手，颜色清晰，使用方便，保存也简单。无论是短期还是长期，都能保证你的实验顺利进行。赶紧试试吧！

𐟧쨁š丙烯酰胺凝胶电泳检测技巧 𐟔 蛋白质纯度鉴定，SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳来帮忙！这是最简单、成本低的检测方法，灵敏度高，能轻松确定样品中蛋白质组分数目。 𐟒ᠥŸ𚦜쥎Ÿ理：聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE），以聚丙烯酰胺凝胶为支持介质，利用电泳分离蛋白质。凝胶机械强度好，稳定透明，是理想的电泳支持物。 𐟓 实验步骤来啦： 1️⃣ 制胶：根据蛋白大小，选择合适浓度的胶，蛋白小选高浓度，蛋白大选低浓度。 2️⃣ 加样、电泳：胶凝固后，加入蛋白marker和待测蛋白，倒入电泳缓冲液，接通电源开始跑胶。 3️⃣ 染色、脱色：等溴酚蓝跑到胶末端，关闭电源，去除浓缩胶，分离胶放入考马斯亮蓝染色液中染色40分钟，再放入脱色液中脱色1小时。 4️⃣ 结果解读：根据Marker判断蛋白大小，看有无杂带判断纯度，用BSA标准品制作标曲，计算目的蛋白浓度。 𐟓‹ 样品要求：浓度>0.5ug/ul，体积>50ul，含盐量≤20mM。 𐟔젩€‰择实验方法时，考虑是否需要还原剂。还原性-SDS-PAGE检测含还原剂上样缓冲液，非还原性-SDS-PAGE则不含。 𐟒ᠥ𐏨𔴥㫯𜚨š丙烯酰胺凝胶电泳是蛋白质纯度鉴定的好帮手，掌握技巧，轻松上手！

小分子蛋白WB，这样跑！有小伙伴问我，小分子蛋白的Western Blot怎么跑。作为一个经常跑15KD、12KD、20KD蛋白的老手，我来分享一些我的小经验吧。选择合适的聚丙烯酰胺凝胶 𐟧ꊩ€‰择对的胶是关键！小分子蛋白的marker千万别跑到胶的最下面。比如，你要跑12KD的蛋白，选择10KD和15KD、20KD分得开的胶会更好。如果最下面的两个marker挨得太紧，比如10KD和15KD，那你孵育10～15KD的蛋白可能效果不好。一般来说，15以内的小分子蛋白尽量选15%或者13.5%的胶。浓缩胶长一点更好 𐟓‰ 跑小分子蛋白时，浓缩胶长一点效果会更好。自己配胶的小伙伴可以把浓缩胶配得长一点。进入分离胶后不要立马调电压，等marker更明显一些再调电压。分离层调电压不要太高，小分子低电压跑。85V浓缩，让蛋白在浓缩胶里更聚集一些；130V分离，非小分子蛋白我一般用150V。上样量要足 𐟒犨𗑥𐏥ˆ†子蛋白时，上样量要比平时多一点。一般跑胶20～30ug足够，跑小分子蛋白上30～40ug，根据自己的目的蛋白调整。尽量使蛋白浓度高，上样体积小。用1.5mm的板跑小分子蛋白，条带成功率更大。转膜技巧 𐟔„ 小分子蛋白转膜最好用0.22um的PVDF膜。0.22um的膜不用担心转过，小分子大分子可以一起转也没问题。如果要用0.45um的膜转小分子蛋白，记住一个原则：理论上1KD转1min，再比理论上多10min即可，转太久容易丢失蛋白信号。例如：15KD的蛋白，可以85V恒压或350mA恒流转30min。封闭正常封闭即可，封闭完可以洗10min再敷一抗。敷一抗 𐟦 保证抗体好用，增加孵育时间。我一般过夜孵育14小时。希望这些小技巧能帮到大家！如果有更多问题，欢迎在评论区继续讨论哦！

GST实验：探P53与HSP70 ### 实验目的通过构建GST-P53融合蛋白表达载体，利用GST pull-down技术沉淀与P53蛋白互作的蛋白，并通过Western Blot（WB）验证P53与HSP70的潜在互作。材料准备 DL2000 DNA Marker（YEASEN，cat.No 10501ES60）琼脂糖（BIOWEST，cat.No 111860） GST pull-down试剂盒（Ruqi.biotech，cat.No RQ0085）主要仪器凝胶成像仪（勤翔，cat.No 6100）高速离心机（Eppendorf，cat.No 5810R）方法概述捕获蛋白制备细胞收集与洗涤裂解细胞，获取上清保留一部分上清作为input样本诱饵蛋白制备对GST-P53表达菌液进行洗涤和裂解磁珠的准备和与诱饵蛋白结合 GST pull-down操作结合诱饵蛋白与捕获蛋白裂解液洗涤和裂解磁珠上的蛋白复合物收集上清以进行后续分析银染与WB结果详细银染步骤，从固定到最后的水洗涤对银染和WB结果的描述和分析实验原理 GST pull-down实验基于亲和层析的原理，通过GST融合蛋白与GSH磁珠的结合，实现与目标蛋白的物理性互作沉淀。详细解释了实验中蛋白-蛋白互作的分子机制和该技术如何使我们能够研究这些相互作用。结果分析详细记录了银染和Western Blot的实验结果，并对数据图像进行分析，评估GST-P53与HSP70互作的证据，并探讨实验结果的意义。实验操作的注意事项诱饵蛋白与GST融合的重要性，以及在实验中如何保证融合蛋白的活性。细胞裂解条件对实验结果的影响，包括Protease inhibitor及PMSF的使用以保护蛋白质不被降解。详细说明磁珠处理的操作要点，包括磁珠的选择、洗涤、和蛋白结合的最佳条件。实验的数据处理与统计分析通过凝胶成像系统和相关软件对电泳条带进行定量分析。描述Western Blot结果的定性分析流程，包括膜转移、抗体孵育以及信号的检测。实验结果展示 WB实验结果 GST-银染检测总结总结本次GST pull-down实验的关键发现，并提出后续研究的建议，包括可能的实验改进、进一步的验证实验，以及本实验结果如何为未来研究P53相关疾病提供信息。

如何选择适合你的蛋白Marker？𐟤” 𐟌Ÿ实验目的：首先，明确你的实验目的。如果你只需要通过电泳观察蛋白条带的大小，那么非预染蛋白Marker是个不错的选择，因为它们价格实惠且条带大小准确。但如果你正在进行Western Blotting实验，预染蛋白Marker会更适合，因为它们可以实时显示电泳和转膜的过程。 𐟌Ÿ覆盖范围：选择蛋白Marker时，确保其分子量范围能够覆盖你的目标蛋白大小。一般来说，选择分子量较小、中等和较大的标准，以涵盖不同大小的蛋白。 𐟌Ÿ双标记Marker：有些Marker是双标记的，可以在电泳过程中染色。这种Marker适用于双色标记（例如荧光和化学发光）的应用，提供更多的实验选择。 [相关图片中的文字]：预染蛋白Marker（10-180kD）预染蛋白Marker(10-250kD) 低分子量预染蛋白Marker(1.7-40kD) 𐟓…稳定性测试： 37℃及25℃常温稳定性实验 15%Tris-Glycine，1.5mm TGS，140v，80min 25℃下35天几乎看不出任何变化 37℃下第28天后大分子条带(180k)稍变弱 80℃稳定性实验 2.5%Tris-Glycine，1.5mm TGS，140v，80min 恒温恒湿80℃下保压5小时，对易优的小分子无影响，但大分子逐渐变弱 50℃稳定性实验 2.5%Tris-Glycine，1.5mm TGS，140v，80min 恒温恒湿50℃下对易优的产品影响小，对T品牌的对照品影响大通过这些测试，你可以更好地选择适合你的蛋白Marker，确保你的实验结果准确可靠。

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